Доклинические и ранние клинические испытания высокоселективного ингибитора альдостеронсинтазы (CYP11B2)

Введение

  • Первичный гиперальдостеронизм (ПГА) – частая причина резистентной артериальной гипертензии.
  • Препаратами выбора при лечении ПГА являются антагонисты минералокортикоидных рецепторов (АМР), однако, они
    • не всегда хорошо переносятся пациентами,
    • вызывают увеличение продукции альдостерона.
  • Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что некоторые эффекты альдостерона могут реализовываться через негеномные пути, это привело к исследованию альтернативных подходов к снижению эффектов альдостерона путем ингибирования альдостеронсинтазы (АС, кодируется геном CYP11B2).

АС экспрессируется в клубочковой зоне коры надпочечников и катализирует последние 3 реакции синтеза альдостерона от 11-дезоксикортикостерона (последовательно кортикостерон, 18-гидроксикортикостерон) до альдостерона.

  • В синтезе альдостерона и в синтезе кортизола участвует несколько одинаковых ферментов, например, фермент 11β-гидроксилаза, катализирующий последние шаги в синтезе кортизола (от предшественника 11-дезоксикортизола), (Рис.1).
    • Фермент 11β-гидроксилаза – расположен в пучковой и сетчатой зонах, кодируется геном CYP11B1.

Ангиотензин II, калий и адренокортикотропный гормон (АКТГ) – основные физиологические агонисты, регулирующие секрецию альдостерона.

Единственный ингибитор альдостеронсинтазы вошедший во вторую фазу клинических испытаний – LCI699.

  • Это вещество уменьшало уровень альдостерона в плазме у здоровых людей и людей, больных ПГА.
  • Оно снижало артериальное давление у пациентов с первичным гиперальдостеронизмом, гипертонической болезнью и резистентной гипертензией.
  • Однако недостаточная избирательность данного вещества в клинически эффективной дозе привела к подавлению уровня кортизола, что, следовательно, привело к прекращению применения его для лечения АГ.
  • В настоящее время идет разработка лечения синдрома Кушинга с применением LCI699.

RO6836191 был разработан как высокоселективный и мощный ингибитор альдостеронсинтазы, принадлежащий к системе новых тетрагидроизохинолиновых соединений.

  • Учеными была исследована селективность, эффективность и безопасность RO6836191 в различных доклинических тест-системах, в том числе in vitro в клетках, экспрессирующих рекомбинантные CYP11B1 и CYP11B2 ферменты.
  • Так как крысиный и человеческий  CYP11B2 гомологичны только на 68%, доклинические фармакологические характеристики и хроническая токсичность были определены на яванских макаках.
  • Затем исследователи использовали новый тип ранних клинических испытаний, получивший название фаза 0 или микродозирование (first-in-man), в течение которого они измеряли метаболизм и токсичность препарата, чтобы перевести исследование из доклинической стадии в клиническую.

Методы

Ингибирование CYP11B1 и CYP11B2 in vitro

  • Эффект RO6836191 на CYP11B1 и CYP11B2 был оценен на человеческих почечных клетках леймиобластомы (АТСС CRL1440), экспрессирующих рекомбинантные человеческий или обезьяний CYP11B1 и CYP11B2 ферменты.
  • Клетки инкубировали в течение 16 часов в присутствии различных субстратов (11-дезоксикортикостерон для CYP11B2 и 11-дезоксикортизол для CYP11B1).
  • Стероидные продукты (для CYP11B2 альдостерон; для CYP11B1 кортизол) были измерены, используя методы флуоресценции (HTRF).
  • Исследование проводилось в 5 и 8-13 копиях для CYP11B2 и CYP11B1 соответственно.

Фармакологическое исследование на обезьянах

  • 20 животных получали зондовое питание, наполнитель без активного вещества и RO6836191 (0,035, 3 или 30 мг/кг, 2 обезьяны на 1 дозу).
  • Спустя один час после введения ингибитора альдостеронсинтазы вводили 0,0145 мг/кг Синактена (АКТГ) внутримышечно.
  • Образцы крови были собраны до и после введения вещества для анализа RO6836191, кортизола, альдостерона и их предшественников.

Доклинические исследования безопасности на обезьянах

  • Проводились 4-х недельное исследование высокими дозами и 4-х недельное механистическое исследование.
  • В исследовании высокими дозами изучались дозы от 0 до 40 мг/кг, оценивались обратимость, персистенция и отсроченные проявления при применении дозы 40 мг/кг без  адекватной электролитной поддержки.
  • На 16 день при использовании дозы 40 мг/кг клинические признаки дегидратации (увеличение потребления воды, питье мочи, потеря эластичности кожи) потребовали приостановления дозирования в течение 3-х дней.
  • Животным дали свободный доступ к электролитам в бутылках с 17 дня, что привело к быстрому регрессу дегидратации и позволило закончить 4-х недельное исследование.

В 4-х недельном механистическом исследовании применялись дозы от 0 до 1 мг/кг:

  • для того чтобы понять были ли изменения в надпочечниках в высокодозном исследовании всецело вследствие солевого истощения и последующей активацией ренин-ангиотензиновой системы,
  • исследовать обратимость любых изменений в клубочковой зоне надпочечников.

Животные получали

  • либо наполнитель отдельно, либо сам RO6836191 0,15 или 1 мг/кг, с электролитными добавками и с/или без ингибитора ангиотензин-превращающего фермента (иАПФ) – лизиноприла 0,5 мг/кг.
  • Дополнительная группа получала 1 мг/кг RO6836191 без электролитных добавок или ингибитора АПФ.

В обоих исследованиях, животные подвергались воздействию веществом в течение 4 недель и затем еще 4 недели оставались под наблюдением без введения каких-либо доз для оценки восстановления.

Исследования проводились организацией, аккредитованной международной ассоциацией по оценке и аккредитации условий содержания лабораторных животных (AAALAC).

Гистология и иммуногистохимия

Последовательные срезы (номинальная толщина ≈5 мкм) были приготовлены из формалин-фиксированных, парафин-врезанных надпочечников всех животных. Надпочечники окрашивали гематоксилином-эозином, а также оценивали

  • Ki-67 (маркер пролиферативной активности),
  • CYP11B2 (маркер альдостеронсинтазы),
  • TUNEL (ник-концевое мечение dUTP при помощи терминальной деоксинуклеотидил трансферазы (TdT); маркер апоптоза).

Ранние клинические испытания, фаза 0 (микродозирование)

Это адаптивное, одноцентровое, рандомизированное, слепое, плацебо-контролируемое исследование однократно нарастающих доз по изучению безопасности, переносимости, влияния фармакокинетических и фармакодинамических эффектов RO6836191 на здоровых мужчин (NCT01995383), проведенное в Нидерландах.

RO6836191 принимался в виде орального раствора натощак. Испытуемым было рекомендовано потреблять не менее 1,5 л жидкости в день.

Исследование состояло из двух частей:

  • В I части, в общей сложности 64 испытуемых получали однократно нарастающую дозу 1, 3, 10, 30, 90, 180, или 360 мг RO6836191 или соответствующую дозу плацебо (активное лечение/плацебо соотношение 3/1) в условиях нормальной солевой диеты с АКТГ-стимуляцией (N=56) или без АКТГ-стимуляции (N=8).
  • Во II части, в общей сложности 24 добровольца получили однократную пероральную дозу 1, 3 или 10 мг RO6836191 или плацебо (соотношение активного лечения/плацебо 3/1).
    • В 2-х факторном перекрестном исследовании с 2-х – 3-х недельным ликвидационным периодом, каждый испытуемый придерживался диеты с низким и нормальным содержанием соли, при этом после ликвидации последствия приема предыдущего препарата изменения в лечении не проводились.

Дозирование препарата при диете с низким содержанием соли проводилось в течение 3-х дней в клинике, субъекты соблюдали диету с низким содержанием соли 50 ммоль натрия в день и от 70 до 100 ммоль калия в день, значения подтверждались содержанием натрия и креатинина в моче. Низкосолевая диета продолжалась до 48 часов после приема препарата.

Контролировались в начале и после приема вещества:

  • побочные эффекты,
  • жизненно важные функции организма,
  • ЭКГ,
  • стандартные лабораторные данные безопасности (гематология, коагулограмма, биохимический анализ крови, и общий анализ мочи),
  • масса тела.

Ингибирование альдостеронсинтазы оценивалось различными тестами, стимулирующими высвобождение альдостерона:

  • АКТГ-стимуляция (внутривенное введение 0,25 мг Козинтропина, через час после приема препарата только в I части исследования),
  • постуральные изменения (оценивались через 6 часов после приема препарата в I и II частях, при этом испытуемые обязаны были стоять или двигаться в течение 30 минут перед взятием анализов, в то время как в других отрезках времени фармакодинамические пробы были взяты в лежачем положении),
  • низкосолевая диета.

Образцы крови (взятые перед и после введения препарата) были взяты для оценки уровней в плазме альдостерона, кортизола, их предшественников, активности ренина плазмы (АРП), АКТГ и электролитов.

  • Образцы крови были взяты до и спустя 4 часа после АКТГ-стимулирующего теста для измерения кортизола и предшественников.
  • В моче (собранная с 1 дня и до 48 часов после приема препарата) измерялось количество электролитов, альдостерона, тетрагидроальдостерона и кортизола.

Все фармакодинамические оценки и процедуры были проведены в начале исследования и после приема вещества. Образцы крови для фармакокинетического анализа RO6836191 были собраны на 96-ой час после приема препарата, проба была взята на 9-й день и в последующие посещения.

Исследование было одобрено местным независимым комитетом по этике и органами здравоохранения и проводилось в соответствии с положениями Хельсинкской декларации. Письменное информированное согласие было получено от каждого участника исследования перед проведением каких-либо связанных с протоколом процедур.

Результаты

Оценка селективности RO6836191 в лабораторных условиях

Продукция кортизола и альдостерона клетками леймиобластомы почки, экспрессирующими рекомбинантные человеческий или обезьяний ферменты CYP11B1 и CYP11B2, была измерена в присутствии соответствующих субстратов этих ферментов.

  • Значения Ki RO6836191 в этих клетках показали, что RO6836191 является мощным, селективным и конкурентным ингибитором альдостеронсинтазы (Таблица 1).
  • Он ингибировал АС в 800 и 100 раз мощнее, чем 11β-гидроксилазу (CYP11B1) в клетках обезьян и людей, соответственно.

Гистопатологический эффект RO6836191 на клубочковую зону надпочечников у обезьян

  • Клубочковая зона надпочечников – основная подвергающаяся действию препарата ткань, в ней происходили изменения в самой низкой дозе (1 мг/кг), которая затем использовалась в качестве высокой дозы в механистическом исследовании.
  • Результаты полуколичественного анализа обоих исследований приведены в таблице 2.

Наблюдалось лекарственно-зависимое увеличение клубочковой зоны надпочечников, гипертрофия и увеличение экспрессии альдостеронсинтазы (CYP11B2) в клетках гломерулярной зоны при дозах 1 или 7 мг/кг. При дозе 40 мг/кг RO6836191 толщина клубочковой зоны и экспрессия CYP11B2 уменьшились по сравнению с более низкими дозами.

  • Изменения в биохимическом анализе крови и анализах мочи согласуются с натрийуретическим действием RO6836191, в частности активность ренина плазмы была увеличена у обоих полов при дозе 1 и 7 мг/кг.
    • При данных дозах уровень альдостерона явно снижался без изменения уровня кортизола.
  • При самой высокой дозе в 40 мг/кг, уровень ренина не изменялся, скорее всего, потому что при высоких дозах препарата животные получали электролитные добавки.
    • При данной дозе наблюдалось снижение уровня кортизола в дополнение к ожидаемому уменьшению уровня альдостерона, что свидетельствует о потере селективности в отношении 11β-гидроксилазы (CYP11B1).
  • Все значения после 4-х недельного перерыва в приеме препарата вернулись к таким же значениям как в контрольной группе (см. рис. 2).

Неокрашенная переходная зона на стыке клубочковой и пучковой зон присутствовала у обезьян, получавших плацебо и отсутствовала у обезьян, получавших RO6836191.

  • Апоптоз и пролиферация клеток клубочковой зоны также были увеличены у обезьян, получавших препарат.
  • После 4-х недельного перерыва в применении данного лекарственного средства наблюдалась тенденция к обратимости повышенной экспрессии CYP11B2, в то время как апоптоз и пролиферация клеток клубочковой зоны сохранялась (см. рис. 3А).

В механистическом исследовании, электролитные добавки улучшили патогистологическую картину в надпочечниках (см. рисунок 3В), которая имела место в исследовании высоких доза, а именно:

  • минимально сузили расширенную клубочковую зону,
  • снизили экспрессию CYP11B2,
  • снизили пролиферацию клеток.

Кроме того, одновременное применение ингибиторов АПФ, электролитов вместе с RO6836191 в дозе 1 мг/кг привело к дополнительным эффектам, в частности, к сохранению переходной зоны.

  • При дозе 0,15 мг/кг расширение гломерулярной зоны не наблюдалось.
  • АРП была увеличена только при дозах  >0,15 мг/кг.
  • АРП оставалась высокой в присутствии электролитных добавок, это почти сопоставимо со значениями АРП в контрольной группе, получавшей электролитные добавки и ингибитор АПФ.
  • Измерение альдостерона и кортизола показало ожидаемое снижение первого и отсутствие изменений второго, соответственно, на всех дозах.
  • Ожидаемое снижение альдостерона наблюдалось также в группе, принимавшей только ингибитор АПФ (см. рис. 4).

Фармакологические характеристики у яванских макак

Эффект однократной пероральной дозы RO6836191 (0-30 мг/кг) на уровни альдостерона, кортизола и их предшественников после  АКТГ-стимулирующего теста показан на рисунке 5.

RO6836191 подавлял продукцию альдостерона во всех испытываемых дозах по сравнению с наполнителем препарата без активного компонента;

  • при дозах от 0,035 мг/кг до 30 мг/кг уровень альдостерона снижался от 70% до 90%, соответственно.

Предшественники 11-дезоксикортикостерон и 11-дезоксикортизол повышались только при высоких дозах препарата (до 600% при 30 мг/кг), уровни кортизола и кортикостерона не отличались от наполнителя препарата без активного компонента.

Снижение уровня альдостерона и отсутствие изменений в уровне кортизола после АКТГ-стимулирующего теста при применении RO6836191 соответствовало селективности препарата доказанной в экспериментах in vitro.

Доказательство механизма действия на здоровых испытуемых

Безопасность, переносимость и фармакокинетика

RO6836191 хорошо переносился испытуемыми при всех дозах. Самые частые побочные эффекты были:

  • головная боль,
  • назофарингит,
  • астения,
  • диарея, которые также регистрировались у группы принимавшей плацебо; все проявления протекали в легкой форме.

Дозозависимого повышения возникновения описанных ранее побочных эффектов не наблюдалось.

  • Изменения в артериальном давлении и частоте пульса от начала до 3-х дней исследования не показали никакой корреляции и не отличались от таковых от плацебо.
  • RO6836191 быстро всасывался и максимальная концентрация его в плазме достигала через 0,5-2 часа.
  • Период полувыведения составил 29 часов, ~10% препарата выводилось почками в неизменном виде.

Фармакологическая характеристика препарата у здоровых испытуемых после АКТГ-стимулирующего теста и сравнение результатов с данными, полученными от яванских макак

  • Изменения уровней альдостерона, кортизола в плазме крови после приема однократной нарастающей дозы RO6836191 или плацебо с применением АКТГ-стимулирующего теста показаны на рисунках и .
  • Дозозависимые изменения уровней альдостерона, кортизола и их предшественников показаны на рисунках и 6D.

В отсутствие препарата после АКТГ-стимулирующего теста уровни альдостерона и кортизола в плазме крови повышались, всплеск пика был через 0,5 и 2 часа после теста, соответственно. Постуральные изменения вызывали похожий всплеск уровня альдостерона в плазме, как и после АКТГ-стимулирующего теста.

  • После введения RO6836191 уровень альдостерона в плазме крови снижался дозозависимо; максимальный эффект был достигнут при дозе 10 мг (отличается от плацебо Р<0,0001).
  • При применении всех доз уровни кортикостерона и кортизола оставались неизменными в сравнении с плацебо.
  • При дозах >90 мг, возникало дозозависимое (отличается от плацебо р<0,01) увеличение 11-дезоксикортикостерона (максимальное изменение среднего значения AUC от начального  уровня +194%) и 11-дезоксикортизола (максимальное изменение среднего значения AUC от начального +193%).
  • Уровень 18-гидроксикортикостерона снизился при дозе препарата в 1 мг с максимальным эффектом при дозе 10 мг и далее (р<0,01; максимальное изменение среднего значения AUC от начального – 58.6%).
  • Повышение в плазме концентраций предшественников 11-дезоксикортикостерона (субстрат для CYP11B1 и CYP11B2) и 11-дезоксикортизола (субстрат для CYP11B1) при дозах препарата >90 мг было пропорционально менее значимым, чем снижение уровня альдостерона.

Вследствие уменьшения альдостерона в плазме крови, экскреция альдостерона и его метаболита (тетрагидроальдостерона) снижалась дозозависимо (Рис. 7). Дозозависимого эффекта на выделение с мочой кортизола не наблюдалось.

RO6836191-индуцированные изменения в уровнях альдостерона, кортизола их предшественников качественно и количественно сравнили между обезьяной и человеком по отношению к соответствующим значениям Ki и выявили, что RO6836191 демонстрирует активность и селективность, как и в исследовании in vitro (таблица 3).

Фармакокинетические/фармакодинамические (ФК/ФД) характеристики у здоровых добровольцев и сравнение с in vitro клеточной эффективностью

Воздействие RO6836191 на альдостерон и его предшественников у испытуемых, которые получали исследуемый препарат при нормальной солевой диете или диете, с уменьшенным потреблением соли наблюдалось при таких же дозах после АКТГ-стимулирующего теста, как и без АКТГ-стимулирующего теста.

  • ФК/ФД анализ показал, что уровень альдостерона в плазме уменьшается, а уровни 11-дезоксикортикостерона и 11-дезоксикортизола увеличиваются в прямой зависимости от  концентрации RO6836191.
  • ФК/ФД модель обеспечивает хорошую оценку диапазона концентраций, при котором RO6836191 является эффективным и селективным ингибитором продукции альдостерона, но не производства кортизола.
  • Значение половины максимальной ингибирующей концентрации (IC50) аналогично значениям Ki in vitro человеческих клеток.

Влияние на электролиты, ренин, АКТГ и у здоровых добровольцев

  • Диета с низким содержанием соли вызвала ожидаемое увеличение в плазме уровней альдостерона и АРП.
  • Экскреция натрия увеличивалась (до 100% от начальной) дозозависимо под воздействием RO6836191 (0-10 мг)  при соблюдении диеты с низким содержанием соли.
  • Увеличение в моче натрия (0-360 мг) наблюдалось также при соблюдении неконтролируемой диеты с нормальным содержанием соли, разницы с плацебо не наблюдалось.
  • Отмечались только незначительные изменения содержания калия в моче (≤20%). Было очевидным увеличение соотношения калия/натрия в моче при контролируемой диете с низким содержанием соли.
  • Отсутствие изменений уровня креатинина в моче или уровней электролитов (калия, натрия) в плазме крови было очевидным. При исследовании однократных доз введение RO6836191 привело к незначительным (<2-х кратное увеличение) изменениям в АРП.

Никаких дозозависимых или связанных с диетой изменений АКТГ не наблюдалось.

Обсуждение

Данное исследование показывает, что, несмотря на тесную гомологию двух ферментов, катализирующих заключительные этапы синтеза альдостерона и кортизола, есть возможность, что 1 молекула может полностью подавлять один фермент и не влиять на другой.

  • Доклинические исследования, проведенные вначале на клеточных структурах, а затем на обезьянах спрогнозировали в значительной степени дозы препарата, которые селективно ингибируют продукцию альдостерона у людей.
  • Терапевтический диапазон RO6836191 для оптимального подавления альдостерона в плазме крови должны будут определить в последующих клинических исследованиях.
    • Высокий уровень подавления продукции альдостерона достигается за счет однократных доз в 3 мг и практически полное подавление при дозах в 10 мг.
    • В отличие от этого, уровни предшественников начинают увеличиваться в дозе 90 мг, а уровень кортизола остается неизменным до самой высокой дозы (360 мг).

Исследователи считают, что решающим значением в оценке селективности, воздействия, потенциальной клинической пользы препарата, в качестве ингибитора альдостеронсинтазы, является демонстрация в широком диапазоне доз, при которых уровень альдостерона снижался бы без подъема уровня его предшественника – 11-дезоксикортикостерона.

  • Альдостерон и 11-дезоксикортикостерон имеют примерно равное и высокое сродство к минералокортикоидным рецепторам и циркулируют в плазме крови относительно в равных концентрациях при нормальных условиях; однако, свободной фракции альдостерона (0,30–0,50) больше, чем 11-дезоксикортикостерона (<0,05).
  • В случае дисбаланса между уровнями свободного альдостерона и свободного 11-дезоксикортикостерона, минералокортикоидный эффект 11-дезоксикортикостерона может стать существенными и высокий уровень 11-дезоксикортикостерона тем самым может нивелировать эффект препарата снижать продукцию альдостерона.

Так как 11-дезоксикортикостерон является субстратом как для CYP11B1, так и для CYP11B2, необходимо избегать активации CYP11B1 для предотвращения накопления предшественников при ингибировании CYP11B2.

  • Это наблюдение может объяснить относительно низкий клинический эффект препарата на артериальное давление, по сравнению с блокаторами минералокортикоидных рецепторов и менее селективного чем RO6836191 ингибитора альдостеронсинтазы LCI699.

RO6836191 не влияет на способность CYP11B1 трансформировать 11-дезокстикортикостерон в кортикостерон; однако, на сегодняшний день исследователи не имеют данных, подтверждающих, что активность 11β-гидроксилазы CYP11B2 тормозится RO683619.

Высокий коэффициент селективности RO6836191 in vitro привел исследователей к изучению широкого диапазона доз in vivo, позволяя количественно определить дозы, в пределах которых можно ожидать подавления уровня альдостерона, но не кортизола.

  • Хотя однократные дозы RO6836191 в фазе 0 исследований не могут установить клинического диапазона препарата, использование обычных ФК/ФД анализов позволило исследователям сопоставить дозы, при которых наблюдались биохимические реакции с ранее измеренным значением Ki RO6836191 для 2-х ферментов, CYP11B1 и CYP11B2.

Недавно были сообщения о некоторых других селективных ингибиторах альдостеронсинтазы, но те, которые на сегодняшний день были испытаны на людях, не уменьшали уровень альдостерона в плазме крови более 70%, даже при высоких дозах.

  • Предыдущие ингибиторы альдостеронсинтазы, вошедшие в клинические разработки были Фадрозол и LCI699.
    • LCI699 был перепрофилирован для лечения болезни Кушинга, где избыток кортизола является основным клиническим признаком, а Фадрозол – ингибитор ароматазы, используется для лечения рака молочной железы.

Исследователи провели обширные доклинические исследования на яванских макаках, чтобы понять изменения в клубочковой зоне надпочечников под воздействием препарата.

  • Интересно, что и у других ученых, проводящих исследования на АС−/− мышах, под воздействием RO6836191 проявлялись изменения в  надпочечниках, а именно, расширение клубочковой зоны; увеличение экспрессии АС; гипертрофия, пролиферация и апоптоз клеток клубочковой зоны.
  • Частичное снижение апоптоза и улучшение других адаптивных изменений в клубочковой зоне возникали на фоне приема электролитов и иАПФ, что соответствовало противодействию эффектам RO6836191 такими как: потеря соли при дозах ≥1 мг/кг.

Однако не все эффекты RO6836191 на клубочковую зону надпочечников были отменены путем применения иАПФ и электролитных добавок.

  • Исследователи не могут исключить возможность того, что дозы иАПФ, или электролитов, было недостаточны, чтобы полностью предотвратить истощение натрия в организме.
  • Остаточное увеличение экспрессии CYP11B2 и апоптоза в гломерулярной зоне согласуется с изменениями в надпочечниках у АС−/− мышах, которые предположительно объясняются тем, что клетки клубочковой зоны мигрируют в медуллярное соединение и подвергаются апоптозу при невозможности синтеза альдостерона.
    • У АС−/− мышей в ответ на истощение в организме натрия наблюдалась повышенная продукция ренина, как и у обезьян в данном исследовании, получающих RO6836191 без солевой добавки.
    • Но увеличение АРП вряд ли может быть единственной или основной причиной изменения в надпочечниках, особенно если повышение ренина частично может быть следствием подавления лизиноприлом продукции ангиотензина. Лишь незначительное увеличение АРП наблюдалось после однократного приема препарата в клиническом исследовании.

Исследователи ожидают увеличение АРП в будущих исследованиях, после многократного приема препарата, с учетом ожидаемого натрийуреза.

  • Эта тенденция уже прослеживалась как в доклинических исследованиях, так и в группе, получающей низкосолевую диету в клиническом исследовании.
  • Хотя не было никаких существенных доказательств натрийуреза после однократного приема RO6836191, ученые наблюдали увеличение Na/K-коэффициента.

Апоптоз клеток может быть полезным у пациентов с гиперальдостеронизмом, особенно если он происходит в так называемых

  1. альдостерон-продуцирующих клеточных скоплениях, которые часто являются единственными остаточными участками продукции альдостерона или в самой
  2. альдостерон-продуцирующей аденоме.

В отличие от этого лекарства, которые блокируют минералокортикоидные рецепторы (т. е. спиронолактон, эплеренон, и новые антагонисты рецептора альдостерона) приводят к увеличению продукции альдостерона.

Ограничением данного исследования для прогнозирования потенциальной клинической пользы ингибирования альдостеронсинтазы является то, что оно было исследованием однократного приема.

  • Исследователям еще предстоит доказать влияние препарата на артериальное давление, так как оно не измерялось при исследованиях по изучению биохимических и патологических последствий RO6836191 у яванских макак и не менялось после введения однократной дозы здоровым добровольцам.
  • Поэтому вполне очевидно, что прогнозы относительно клинической пользы не проверялись, требуются исследования многократных доз и эффект снижения артериального давления у пациентов с первичным гиперальдостеронизмом при использовании селективного ингибитора альдостеронсинтазы.

Тем не менее, первым и важным шагом было показать, можно ли преодолеть  препятствие в 93% гомологии между альдостеронсинтазой и 11β-гидроксилазой (т.е. выявить селективность препарата), и если да, то какие последствия могут быть для циркулирующих уровней субстратов и продуктов 2-х ферментов.

  • Данные результаты показывают, что снижение продукции альдостерона может рассматриваться как вариант лечения и обеспечивают некоторую уверенность в том, что дальнейшие селективные ингибиторы альдостеронсинтазы могут быть разработаны с использованием обезьян как доклинических видов для механистического исследования ингибирования продукции альдостерона.
  • Cелективное ингибирование альдостеронсинтазы может быть достигнуто в организме человека без подъема уровня кортизола и компенсаторного увеличения 11-дезоксикортикостерона.
  • Доклинические данные подчеркивают вероятное значение альдостерона в регулировании обратимости изменений в клетках клубочковой зоны, с возможностью того, что ускоренная обратимость данных изменений может способствовать большей эффективности в применении ингибиторов альдостеронсинтазы в сравнении с блокаторами рецепторов, которые повышают секрецию альдостерона.

Перспективы

  • Гомология между двумя ферментами, катализирующими заключительные этапы синтеза альдостерона и кортизола, была тупиком в разработке лекарств, которые подавляют секрецию альдостерона, а не блокируют его эффекты.
  • Данное исследование показывает, что селективность, полученную в in vitro можно перевести в клиническую практику. Результаты исследований однократных доз на яванских макаках помогают прогнозировать выводы исследований многократных доз.
  • Важное открытие состоит в том, что концентрация в плазме дезоксикортикостерона, биологически активного субстрата альдостеронсинтазы, не увеличивалась при дозе, селективно ингибирующей продукцию альдостерона.
    • В связи с этим можно предположить большую натрийуретическую и антигипертензивную эффективность, чем при использовании менее селективных ингибиторов.

Источник:

  1. Bogman K, Schwab D, Delporte M-L, et al. Preclinical and Early Clinical Profile of a Highly Selective and Potent Oral Inhibitor of Aldosterone Synthase (CYP11B2). Hypertension (Dallas, Tex : 1979). 2017;69(1):189-196. doi:10.1161/HYPERTENSIONAHA.116.07716.
Поделиться

Оставить комментарий